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生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告優(yōu)秀

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  實(shí)驗(yàn) 生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定

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  一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

  初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。

  二、實(shí)驗(yàn)原理

  1.還原糖的鑒定原理 生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見(jiàn)的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒(méi)有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實(shí)驗(yàn)中,用斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。

  斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05 g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下:

  CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O

  用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液的顏色變化過(guò)程為:淺藍(lán)色 棕色 磚紅色(沉淀)。

  2.蛋白質(zhì)的鑒定原理 鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01 g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物,這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。

  3.脂肪的鑒定原理 脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ染成紅色

  三、實(shí)驗(yàn)過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P18)

  四、實(shí)驗(yàn)用品(見(jiàn)書(shū)P18)

  五、注意

  1.關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn),在加熱試管中的溶液時(shí),應(yīng)該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開(kāi)水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過(guò)于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開(kāi)大燒杯中的開(kāi)水。

  2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。

  3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B

  六、討論

  鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據(jù)是什么?

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