微生物技術(shù)論文2000字
微生物技術(shù)是現(xiàn)代生物技術(shù)中的一種,是生物技術(shù)的重要組成部分。下面小編給大家分享微生物技術(shù)論文2000字，大家快來跟小編一起欣賞吧。
論文摘要：目的 驗證氨金黃敏顆粒的微生物限度檢查方法是否適用于該供試品的檢查。方法 細(xì)菌計數(shù)采用低速離心―培養(yǎng)基稀釋法，霉菌及酵母菌計數(shù)按常規(guī)檢查法，控制菌按常規(guī)檢查法。結(jié)果 稀釋劑對照組的菌回收率大于70%，試驗組的菌回收率大于70%;陰性對照組未檢出陰性對照菌，試驗組檢出陽性試驗菌。結(jié)論 可以用該微生物限度檢查法進(jìn)行氨金黃敏顆粒的檢查。
主題詞： 氨金黃敏顆粒 檢驗
中圖分類號：R122.1+2
為了保證檢驗方法的科學(xué)性，現(xiàn)對某公司生產(chǎn)的氨金黃敏顆粒的微生物限度檢查方法進(jìn)行方法學(xué)驗證。
一、材料與儀器
1 、試驗樣品 藥品名稱：氨金黃敏顆粒，批號：090901、090902、090903。
2、 驗證用儀器
電熱恒溫干燥箱、電冰箱、電熱恒溫培養(yǎng)箱、恒溫水浴鍋、離心機(jī)、蒸汽滅菌鍋、集菌儀等。
玻璃器皿 錐形瓶、培養(yǎng)皿、量筒、試管、吸管等。
3、 驗證用菌種 金黃色葡萄球菌;大腸埃希菌;枯草芽孢桿菌;白色念珠菌;黑曲霉。
4 、驗證用培養(yǎng)基及稀釋劑 營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基;玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基;膽鹽乳糖培養(yǎng)基;營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基;改良馬丁培養(yǎng)基;曙紅亞甲藍(lán)瓊脂培養(yǎng)基。
二、 驗證條件
無菌室環(huán)境潔凈度為10000級，局部潔凈度為100級，凈化消毒30min以上，供試品及滅菌的器具等經(jīng)傳遞窗紫外殺菌燈照射30min置無菌室內(nèi)，試驗人員手消毒后穿無菌服進(jìn)入操作間。
三、方法與結(jié)果
1 、菌液制備 接種金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、枯草芽孢桿菌的新鮮斜面培養(yǎng)物接種于營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于35℃培養(yǎng)18～24小時，分別取各菌種培養(yǎng)液1ml加入0.9%無菌氯化鈉溶液9ml中，10倍依次稀釋，金黃色葡萄球菌稀釋至10-5，大腸埃希菌稀釋至10-7，枯草芽孢桿菌稀釋至10-5， 約為50～100cfu/ml，備用。
接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，于23～28℃培養(yǎng)23～48小時，取培養(yǎng)液1ml加入0.9%無菌氯化鈉溶液9ml中，10倍依次稀釋至10-5，約為50～100cfu/ml，備用。
取黑曲霉的新鮮斜面培養(yǎng)物，用0.9%無菌氯化鈉溶液5ml將孢子洗下，吸取此溶液1ml置一個無菌的比色管中，加0.9%無菌氯化鈉溶液適量與標(biāo)準(zhǔn)比濁管進(jìn)行比濁，取比濁后的菌懸液1ml加入0.9%無菌氯化鈉溶液9ml中，10倍依次稀釋至10-4，約為50～100cfu/ml，備用。
2 、供試液制備 取供試品10g，加pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液至100ml，用勻漿儀分散混勻，作為1∶10的供試液。
3、細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證試驗
試驗組 細(xì)菌計數(shù)采用低速離心―培養(yǎng)基稀釋法，取1∶10供試液10ml，500轉(zhuǎn)/分離心5分鐘，取全部上清液，用pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液補(bǔ)足至原量，混勻，再從中取1ml分別加入5個平皿中(每皿0.2ml)，加入各陽性細(xì)菌試驗菌1ml，立即傾注相應(yīng)的瓊脂培養(yǎng)基，置32℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h，測定細(xì)菌數(shù)。霉菌及酵母菌計數(shù)采用常規(guī)法，取1∶10供試液1ml，加入各霉菌及酵母菌試驗菌1ml，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，置25℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h，測定霉菌及酵母菌數(shù)。
菌液組 取稀釋好的各菌液1ml，分別加入平皿中，加入相應(yīng)培養(yǎng)基，置規(guī)定條件培養(yǎng)，測定所加的試驗菌數(shù)。
供試品對照組 按試驗組方法，測定供試品本底菌數(shù)。
稀釋劑對照組 取稀釋劑替代供試液，方法同試驗組。
試驗組菌回收率(%)={(試驗組平均菌落數(shù)-供試品對照組平均菌落數(shù))/菌液組平均菌落數(shù)}×100%
稀釋劑對照組菌回收率(%)=(稀釋劑對照組平均菌落數(shù)/菌液組平均菌落數(shù))×100%
4 、控制菌檢查方法的'驗證
試驗組 取1∶10的供試液10ml，置無菌條件下離心(500轉(zhuǎn)/分)5分鐘，取上清液置無菌試管中，pH7.0無菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液補(bǔ)足至原量，混勻，加至膽鹽乳糖培養(yǎng)基100ml中，再加陽性對照菌大腸埃希菌菌液1ml，搖勻，置35～37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時。大腸埃希菌濃度同細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)驗證。
陰性對照組 方法同試驗組，加入1ml陰性菌(即金黃色葡萄球菌，濃度同細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)驗證)，置35～37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24小時。
3.5結(jié)果分析
3.5.1細(xì)菌、霉菌及酵母菌計數(shù)驗證結(jié)論 在三次試驗中，稀釋劑對照組的菌回收率均大于70%，試驗組的菌回收率均大于70%，故可照供試液制備方法和計數(shù)法測定氨金黃敏顆粒的細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)。
3.5.2控制菌驗證結(jié)論 在三次試驗中，陰性對照組未檢出陰性對照菌，試驗組檢出陽性試驗菌，故可用此供試液制備法和控制菌檢查法進(jìn)行氨金黃敏顆粒的控制菌檢查。
四、討論
1、 許多藥品本身的特性(如抑菌性)會對檢驗結(jié)果帶來影響，需要對供試品進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理，以消除其本身帶來的干擾。
2 、藥品的微生物檢查是保證藥品使用安全的重要檢查項目，必須對每個品種的檢驗方法進(jìn)行驗證。
3 、試驗過程中，應(yīng)嚴(yán)格遵守操作規(guī)范，保證結(jié)果的可靠性。
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