生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告(集合15篇)
在經(jīng)濟(jì)飛速發(fā)展的今天,報(bào)告有著舉足輕重的地位,多數(shù)報(bào)告都是在事情做完或發(fā)生后撰寫(xiě)的。我們應(yīng)當(dāng)如何寫(xiě)報(bào)告呢?以下是小編收集整理的生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告,歡迎大家分享。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告1
實(shí)驗(yàn)日期: 年月 日
組長(zhǎng): 組員:
一、實(shí)驗(yàn)要求
1、練習(xí)使用顯微鏡,學(xué)習(xí)規(guī)范的操作方法。
2、能夠獨(dú)立操作顯微鏡。
3、能夠?qū)⒉F瑯?biāo)本移動(dòng)到視野中央,并看到清晰的圖像。
二、實(shí)驗(yàn)原理
三、材料用具
顯微鏡,寫(xiě)有“上”字的玻片,動(dòng)物、植物玻片標(biāo)本,擦鏡紙,紗布。
四、方法與步驟
(一)取鏡和安放
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座
2、把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
(二)對(duì)光
3、轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔(物鏡的前端與載物臺(tái)要保持2厘米的距離)。
4、把一個(gè)較大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開(kāi),便于以后同時(shí)畫(huà)圖)。轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線通過(guò)通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過(guò)目鏡,以看到白亮的視野。
。ㄈ┯^察
5、把所要觀察的玻片標(biāo)本(也可以用印有“e”字的薄紙片制成)放在載物臺(tái)上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中心。
6、轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止(眼睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標(biāo)本)。
7、左眼向目鏡內(nèi)看,同時(shí)反方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
注意事項(xiàng):
1、實(shí)驗(yàn)完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,把兩個(gè)物鏡偏到峽谷旁。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里,
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告2
生物學(xué)是一門實(shí)驗(yàn)科學(xué)。生物新課程倡導(dǎo)面向全體學(xué)生、提高生物科學(xué)素養(yǎng)和探究性學(xué)習(xí)的課程理念。其中探究學(xué)習(xí)是讓學(xué)生在主動(dòng)參與的過(guò)程中進(jìn)行學(xué)習(xí),讓學(xué)生在探究問(wèn)題的活動(dòng)中獲取知識(shí),了解科學(xué)家的工作方法和思維方法,學(xué)會(huì)科學(xué)研究所需要的各種技能,領(lǐng)悟科學(xué)觀念,培養(yǎng)科學(xué)精神。這種學(xué)習(xí)的方式的中心是針對(duì)問(wèn)題的探究活動(dòng),當(dāng)學(xué)生面臨各種讓他們困惑的問(wèn)題時(shí),他就要想法尋找答案。
在解決問(wèn)題時(shí),要對(duì)問(wèn)題進(jìn)行推理、分析,找出問(wèn)題解決的方向,然后通過(guò)觀察、實(shí)驗(yàn)來(lái)收集事實(shí),通過(guò)對(duì)獲得的資料進(jìn)行歸納、比較、統(tǒng)計(jì)分析,形成對(duì)問(wèn)題的解釋。最后通過(guò)討論和交流進(jìn)一步澄清事實(shí),發(fā)現(xiàn)新的問(wèn)題,對(duì)問(wèn)題進(jìn)行更深入的研究。
在此背景理念依據(jù)下,在教學(xué)中教學(xué)模式也將發(fā)生根本的改變,生物課將更多地開(kāi)展學(xué)生的試驗(yàn)、討論、交流等活動(dòng)。引導(dǎo)學(xué)習(xí)教學(xué)模式就是在這種背景下構(gòu)建的。具體的模式結(jié)構(gòu):?jiǎn)栴}——閱讀、實(shí)驗(yàn)——分析、推理、歸納、討論——結(jié)論。
在運(yùn)用這種模式的過(guò)程中我有下面幾點(diǎn)感觸:
1、在教師的引導(dǎo)下學(xué)生可帶者問(wèn)題去閱讀、分析、討論資料,達(dá)到解決問(wèn)題的目的。比如:在學(xué)習(xí)〈空中飛行的動(dòng)物〉時(shí),教師可這樣引導(dǎo)學(xué)生;想一想,我們?nèi)艘朐谔炜兆杂勺栽诘娘w翔必須先解決什么問(wèn)題?
學(xué)生思考后說(shuō);一是,解決了動(dòng)力問(wèn)題。二是,解決了地心引力問(wèn)題。教師隨后提出問(wèn)題:鳥(niǎo)是如何解決這些問(wèn)題的?引導(dǎo)學(xué)生思考,讓學(xué)生帶著問(wèn)題去看書(shū)、閱讀、討論、交流、的出結(jié)論。這樣既可提高學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣,改變學(xué)習(xí)方式,又符合新課程的要求。
2、合理開(kāi)發(fā)的有效地利用一切可以利用的課程資源是實(shí)現(xiàn)課程目標(biāo),轉(zhuǎn)變學(xué)生學(xué)習(xí)方式的關(guān)鍵條件。知識(shí)、技能、經(jīng)驗(yàn)、活動(dòng)方式方法等都是課程資源。在學(xué)習(xí)〈水中生活的動(dòng)物〉時(shí),對(duì)于生活在我這些地方的學(xué)生來(lái)說(shuō),對(duì)水中的動(dòng)物了解不多,而且上課時(shí)還不能做試驗(yàn),學(xué)生缺少感性的認(rèn)識(shí),這時(shí)教師就要引導(dǎo)學(xué)生開(kāi)發(fā)自己已有的課程資源。如:學(xué)習(xí)魚(yú)鰭的作用時(shí)引導(dǎo)學(xué)生想想:獨(dú)槳船和雙槳船他們的槳各起什么作用?在學(xué)習(xí)魚(yú)兒離開(kāi)水為什么會(huì)死?教師可引導(dǎo)學(xué)生回憶:頭發(fā)在水中水什么樣的?從水中出來(lái)時(shí)又是什么樣的?這樣就很容易理解知識(shí),解決了問(wèn)題。
3、信息化是當(dāng)今世界經(jīng)濟(jì)和社會(huì)發(fā)展的大趨勢(shì)。新課程注重現(xiàn)代信息技術(shù)與生物新課程的整合。這樣可有效地應(yīng)用數(shù)字化的優(yōu)勢(shì)達(dá)到學(xué)習(xí)目標(biāo)。教師用編制成的演示文稿、多媒體課件來(lái)引導(dǎo)學(xué)生學(xué)習(xí)或作為學(xué)生自主學(xué)習(xí)的資源。
在課程學(xué)習(xí)中,利用諸多的文字處理、圖形圖像處理、信息集成等工具,讓學(xué)生對(duì)課程學(xué)習(xí)內(nèi)容進(jìn)行重組、創(chuàng)作,不僅使學(xué)生獲得知識(shí),而且能夠幫助學(xué)生建構(gòu)知識(shí)。但是,教師在制作多媒體課件時(shí),把每個(gè)知識(shí)點(diǎn)、每個(gè)環(huán)節(jié)設(shè)計(jì)的過(guò)于完美,在教師的引導(dǎo)下學(xué)生很簡(jiǎn)單的就可掌握知識(shí),完成教學(xué)任務(wù)。但也存在著弊端,這就是學(xué)生的自主學(xué)習(xí)不到位,在獲得知識(shí)的過(guò)程中缺少自主探究的過(guò)程。這個(gè)問(wèn)題就是我發(fā)現(xiàn)的問(wèn)題和努力改進(jìn)的方面。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告3
實(shí)驗(yàn)名稱:
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1.初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2.觀察高等植物的葉綠體在細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的形態(tài)和分布
二、實(shí)驗(yàn)原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀,在不同的光照條件下,葉綠體可以運(yùn)動(dòng),改變橢球體的方向,這樣既能接受較多的光照,又不至于被強(qiáng)光灼傷。在強(qiáng)光下,葉綠體以其橢球體的側(cè)面朝向光源;在弱光下,葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此,在不同光照條件下采集的葫蘆蘚,其小葉內(nèi)葉綠體橢球體的形狀不完全一樣;罴(xì)胞中的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),觀察細(xì)胞質(zhì)的流動(dòng),可以用細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體的運(yùn)動(dòng)做為標(biāo)志。
三、材料用具
蘚類的葉,新鮮的黑藻,顯微鏡,載玻片,蓋玻片,滴管,鑷子,刀片,培養(yǎng)皿,鉛筆
四、實(shí)驗(yàn)過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P30)
1.制作蘚類葉片的臨時(shí)裝片
2.用顯微鏡觀察葉綠體
3.制作黑藻葉片臨時(shí)裝片
4.用顯微鏡觀察細(xì)胞質(zhì)流動(dòng)
物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ·實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式 ·實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板
五、討論
1.細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中的葉綠體是否靜止不動(dòng),為什么?
2.葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關(guān)系?
3.植物細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)處于不斷的流動(dòng)狀態(tài),這對(duì)于活細(xì)胞完成生命活動(dòng)有什么意義?
4.用鉛筆畫(huà)一個(gè)葉片細(xì)胞,標(biāo)出葉綠體的大致流動(dòng)方向。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告4
霉菌的培養(yǎng)與形態(tài)學(xué)觀察:實(shí)驗(yàn)一真菌培養(yǎng)基的配制與滅菌
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
。1)了解培養(yǎng)基的配置原理和方法,掌握分離培養(yǎng)微生物的有關(guān)準(zhǔn)備工作。
。2)掌握高壓滅菌方法及原理
實(shí)驗(yàn)原理:
。1)培養(yǎng)基的制備原理:
培養(yǎng)基是供微生物生長(zhǎng)、繁殖、代謝的混合養(yǎng)料。
從營(yíng)養(yǎng)角度分析:
營(yíng)養(yǎng):碳源、氮源、能源、生長(zhǎng)素、水分和無(wú)機(jī)鹽等;?適宜的酸堿度(pH值)和一定緩沖能力;?一定的氧化還原電位;?合適的滲透壓。
瓊脂是從石花菜等海藻中提取的膠體物質(zhì),是應(yīng)用最廣的凝固劑。加瓊脂制成的培養(yǎng)基在98~100℃下融化,于45℃以下凝固,不容易被微生物污染。但多次反復(fù)融化,其凝固性降低。
。2)濕熱滅菌原理-高壓蒸汽滅菌
在密閉的蒸鍋內(nèi),其中的蒸汽不能外溢,壓力不斷上升,使水的沸點(diǎn)不斷提高,從而鍋內(nèi)溫
度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下,鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下,可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
配制培養(yǎng)基所需器材
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:高壓蒸汽滅菌器。
實(shí)驗(yàn)器材:500ml三角燒瓶、藍(lán)蓋瓶、5ml刻度吸管、培養(yǎng)基、天平、砝碼、
稱量紙、藥勺、500ml、100ml量筒、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐、平皿、剪刀等。
培養(yǎng)基等集中放講臺(tái)前高壓桶內(nèi),送到洗刷室統(tǒng)一高壓滅菌條件及注意事項(xiàng)
高壓滅菌條件:121.3℃,15min。含糖培養(yǎng)基113℃,15min。
倒平板電爐加熱滅菌好的培養(yǎng)基打開(kāi)平皿包裝倒平板(10塊)注意事項(xiàng):空氣環(huán)境無(wú)菌(應(yīng)在酒精燈火焰周圍無(wú)菌區(qū))。
a.在酒精燈火焰處,傾斜打開(kāi)瓶口。
b.瓶口要過(guò)火焰。
c.左手掀開(kāi)平皿小口。
d.傾注滿皿底再多一點(diǎn),約10ml(7cm直徑平皿)。
e.推放一邊要輕緩,不能晃起瓊脂掛壁,易在培養(yǎng)過(guò)程中污染雜菌。
f.完全凝固再翻轉(zhuǎn)平板放塑料筐內(nèi),4℃?zhèn)溆谩?/p>
分析與討論
。1)如何證明培養(yǎng)基滅菌是否徹底?
把滅菌后的培養(yǎng)基按滅菌鍋內(nèi)的不同位置,每處抽取數(shù)管(瓶),標(biāo)上記號(hào),置25℃~30℃培養(yǎng)一周左右進(jìn)行檢查。如果培養(yǎng)基沒(méi)有什么變化,說(shuō)明滅菌效果良好;如果某一位置的培養(yǎng)基出現(xiàn)了雜菌菌落,可能是擺放的太緊,導(dǎo)致蒸汽不暢,或鍋的結(jié)構(gòu)不合理等原因所致,應(yīng)根據(jù)上述情況進(jìn)行改進(jìn);如果大部分或全部菌種瓶都出現(xiàn)雜菌,說(shuō)明滅菌溫度或滅菌時(shí)間不夠,應(yīng)提高壓力或延長(zhǎng)滅菌時(shí)間。經(jīng)過(guò)幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
經(jīng)過(guò)幾次檢驗(yàn)都證明能徹底滅菌后,以后按同樣條件滅菌的則不必進(jìn)行檢查。
。2)為什么說(shuō)消毒與滅菌是微生物學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)必不可少的基本知識(shí)?由于病原生物廣泛存在于自然界,可通過(guò)不同途徑和媒介進(jìn)入人體,引起感染或造成疾病流行。因此,殺滅或清除存在于體外傳播媒介上的病原生物,對(duì)于切斷傳播途徑、預(yù)防和控制其感染具有重要意義。自古以來(lái),人們就利用煮沸、火燒、日曬等方法殺滅或去除微生物,達(dá)到預(yù)防疾病的目的。實(shí)際上,除了在臨床醫(yī)療實(shí)踐中需要防止微生物的污染或感染外,在微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室、食物保存、飲水凈化、藥品與生物制品生產(chǎn)等過(guò)程中都需要避免微生物的污染。
實(shí)驗(yàn)二霉菌的接種與培養(yǎng)
實(shí)驗(yàn)?zāi)康呐c要求:掌握霉菌與酵母菌的接種與培養(yǎng)方法。
實(shí)驗(yàn)原理:
接種是微生物實(shí)驗(yàn)及科學(xué)研究中一項(xiàng)基本操作技術(shù)。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵螅?/p>
選擇合適的接種工具與接種方法,接種工具有接種環(huán)、接種針、接種鏟、接種鉤、吸管、滴管、棉簽等。常用接種方法有:斜面接種,液體接種,穿刺接種,平板接種和固體接種。接種的關(guān)鍵是無(wú)菌操作。
無(wú)菌操作的原則:在酒精燈火焰旁進(jìn)行,所有器皿均須嚴(yán)格消毒,培養(yǎng)基應(yīng)事先做無(wú)菌試驗(yàn),
接種工具使用前后須經(jīng)火焰燒灼滅菌,棉塞不能亂放,始終夾在手指中。在培養(yǎng)四大類微生物時(shí)應(yīng)注意選擇適宜的培養(yǎng)條件。多數(shù)細(xì)菌為專性需氧菌與兼性需氧菌,少數(shù)為厭氧菌。多數(shù)食品腐敗菌和工業(yè)用菌種,以及人和動(dòng)物病原菌的最適生長(zhǎng)溫度為37℃,并且在近中性(PH6.5~7.5)條件下生長(zhǎng)良好。多數(shù)放線菌為好氧菌,少數(shù)為厭氧菌,最適生長(zhǎng)溫度為28~30℃,多數(shù)適宜在偏堿性環(huán)境中生長(zhǎng)(PH7.5~8.5)。
實(shí)驗(yàn)材料與方法
。1)實(shí)驗(yàn)材料:實(shí)驗(yàn)設(shè)備:溫箱。
實(shí)驗(yàn)器材:毛霉、曲霉、青霉、根霉、啤酒酵母、白假絲酵母、新生隱球酵母菌、細(xì)黃鏈霉菌、PDA平板、高鹽察氏平板、高氏合成I號(hào)平板、塑料筐、20%甘油水溶液、鑷子、接種鏟、無(wú)菌蓋玻片、無(wú)菌濾紙、無(wú)菌載玻片、石棉網(wǎng)、牛皮紙、硫酸紙、橡皮筋、鐵絲筐等。
。2)實(shí)驗(yàn)方法:平板接種:毛霉→PDA平板(點(diǎn)植法)
啤酒酵母→PDA平板(五區(qū)分離劃線法)青霉、曲霉→PDA平板(連續(xù)劃線法)
小室載玻片培養(yǎng)法:
1、取滅菌后小室平皿。
2、取無(wú)菌PDA瓊脂薄層平板,用鑷子夾住蓋玻片切割成0.5~1.0cm2的瓊脂塊,并將其移至培養(yǎng)小室中的載玻片上,制作過(guò)程注意無(wú)菌。
3、用接種環(huán)取少量霉菌的孢子接種于培養(yǎng)基四周,用無(wú)菌鑷子
將蓋玻片覆蓋在瓊脂塊上,并(轉(zhuǎn)載于:l滅菌的20%甘油(用于保持濕度),蓋上皿蓋,標(biāo)記,置28~30℃培養(yǎng)3~5d
糧食產(chǎn)品的平板接種:
1.取糧食樣品20g,放入無(wú)菌燒杯,加無(wú)菌水洗滌,
反復(fù)10次,棄去水后,將糧粒倒于平皿內(nèi)備用2.鑷子取糧食種入PDA瓊脂內(nèi),每皿可接種5-10粒。
放線菌的接種:取細(xì)黃鏈霉菌劃線法接種,在接種的劃線處,無(wú)
菌操作斜插入蓋玻片數(shù)張。
注意事項(xiàng):
1.空氣環(huán)境無(wú)菌(應(yīng)在酒精燈火焰周圍無(wú)菌區(qū))
2.在酒精燈火焰處,傾斜打開(kāi)瓶口。
3.接種環(huán)使用前,直接在酒精燈上燒灼滅菌,把環(huán)和金屬絲燒紅即可。
4.接種環(huán)使用后,先在火焰周圍把環(huán)上標(biāo)本烤干,再燒灼滅菌,以免標(biāo)本汽化,爆烈四濺,污染環(huán)境。5.金屬桿快速通過(guò)火焰2-3次,殺滅表面微生物
分析與討論
1、糧食中產(chǎn)毒真菌的種類及產(chǎn)生毒素?
青霉、毛霉、曲霉、根霉、酵母、白念、細(xì)黃鏈霉菌(放線菌)青霉素、絲生毛霉素、黃曲霉素、根霉素、白念菌素。細(xì)黃鏈菌素
2、常用霉菌培養(yǎng)基有哪些?
馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基
豆芽汁葡萄糖(或蔗糖)瓊脂培養(yǎng)基察氏培養(yǎng)基
3、霉菌的接種方法有何不同?為什么?
。1)連續(xù)劃線法(青霉、曲霉)
青霉與曲霉為局限性生長(zhǎng)的霉菌。應(yīng)采用連續(xù)劃線接種法接種。(2)點(diǎn)植法(根霉、毛霉)
根霉與毛霉生長(zhǎng)區(qū)域比較大,應(yīng)采用點(diǎn)植法。(3)小室載玻片培養(yǎng)法(青霉、毛霉、根霉、曲霉)
實(shí)驗(yàn)三霉菌的制片與形態(tài)觀察
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩W(xué)習(xí)并掌握觀察霉菌形態(tài)的.基本方法;
了解四類常見(jiàn)霉菌的基本形態(tài)特征。了解放線菌的基本形態(tài)特征。
實(shí)驗(yàn)原理:霉菌菌絲和孢子的寬度通常比細(xì)菌和放線菌粗得多(約為3-10μm),常是細(xì)
菌菌體寬度的幾倍至幾十倍,因此,用低倍顯微鏡即可觀察。霉菌菌絲較粗大,細(xì)胞易收縮變形,且孢子容易飛散,所以制標(biāo)本時(shí)常用乳酸石炭酸棉藍(lán)染色液,用此染液做霉菌制片的特點(diǎn)是細(xì)胞不變形,具有殺菌、防腐作用,不易干燥,能保持較長(zhǎng)時(shí)間,能防止孢子四處飛散,棉蘭具有一定的染色作用,染液的藍(lán)色能增大反差。
實(shí)驗(yàn)材料:
。ㄒ唬┚N:在馬鈴薯瓊脂平板上培養(yǎng)3—4天的青霉(Penicilliumsp.)、曲霉(Aspergillussp.)、毛霉(Mucorsp.)、根霉;
(二)器材及用具:鑷子、載玻片、蓋玻片、顯微鏡。
實(shí)驗(yàn)方法:
。ㄒ唬┲苯又破^察
于潔凈載玻片上,用鑷子取霉菌菌落的邊緣處取小量帶有孢子的菌絲,然后小心地蓋上蓋玻
片。置顯微鏡下先用低倍鏡觀察,必要時(shí)再換高倍鏡(二)小室培養(yǎng)觀察
將載玻片直接放低倍鏡下觀察,再換高倍鏡觀察。
觀察原則:
毛霉:用低倍鏡觀察孢子囊梗、囊軸等。用高倍鏡觀察孢子囊孢子的形
狀、大小。
根霉:菌絲、孢子同毛霉,注意觀察有無(wú)假根。
曲霉:在高倍鏡下觀察菌絲有無(wú)隔膜,分生孢子著生位置,辨認(rèn)分生孢
子梗、頂囊、小梗和分生孢子。
青霉:在高倍鏡下觀察菌絲有無(wú)隔膜,分生孢子梗、副枝、小梗和分生
孢子的形狀等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
分析與討論:
青霉和曲霉的形態(tài)有哪些異同?
青霉常分布在霉腐變質(zhì)的水果、蔬菜、糧食和皮革等物體上,菌體直立菌絲的頂端長(zhǎng)有掃帚狀的結(jié)構(gòu),結(jié)構(gòu)的每一個(gè)分枝上,生有成串的孢子,成熟的孢子呈青綠色,進(jìn)行孢子生殖。
曲霉廣泛分布在谷物、空氣和土壤中,曲霉直立菌絲的頂端膨大成球狀,球狀結(jié)構(gòu)的表面放射狀地生有成串的孢子,孢子隨曲霉種類的不同而呈黃色、橙色或黑色。
從皮膚取材查真菌如何檢查?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告5
實(shí)驗(yàn)名稱:
觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、學(xué)習(xí)制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本。
2、學(xué)會(huì)使用顯微鏡觀察洋蔥表皮,用圖畫(huà)記錄觀察到的洋蔥表皮細(xì)胞。
3、對(duì)比用肉眼、放大鏡、顯微鏡看到的洋蔥表皮各有什么不同。
實(shí)驗(yàn)重點(diǎn):
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
實(shí)驗(yàn)難點(diǎn):
正確使用顯微鏡。
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
分組實(shí)驗(yàn)器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。 實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、導(dǎo)入課題
出示洋蔥。問(wèn):如果從它的內(nèi)表皮上揭下一塊,用顯微鏡來(lái)觀察能看到些什么呢?(板書(shū)課題)
二、制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本
1、師講解并演示制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本的方法與步驟。
。1)在一個(gè)干凈的玻璃載片中間滴一滴清水;
。2)用小刀在洋蔥鱗葉片內(nèi)壁劃一個(gè)“井”字,用鑷子取下“井”中洋蔥內(nèi)表皮放到載玻片的水滴中央,注意標(biāo)本要平展開(kāi),不能折疊;
(3)用蓋玻片傾斜著蓋到標(biāo)本上面,放蓋玻片時(shí),先放一端,再慢慢放下另一端,注意不要有氣泡。如水不足,可沿蓋玻片邊緣滴加;若水分過(guò)多,可用吸水紙吸掉;
。4)從蓋玻片的一邊滴一滴稀釋的碘酒,并把玻片微微傾斜,再在蓋玻片的另一邊用吸水紙吸掉多余的水;
。5)洋蔥表皮玻片標(biāo)本做成可進(jìn)行觀察。
2、學(xué)生以組為單位自制玻片標(biāo)本(最好制三份裝片,便于下面的對(duì)比觀察),教師巡視指導(dǎo)(教育學(xué)生注意安全)。
三、觀察洋蔥表皮細(xì)胞
1、先用肉眼觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫(huà)在科學(xué)記錄本上。
2、再用放大鏡觀察洋蔥表皮將看到的內(nèi)容畫(huà)到科學(xué)記錄本上。
3、學(xué)生交流用肉眼和放大鏡分別觀察到什么?它們有何不同?
4、利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
(1)、出示顯微鏡,引導(dǎo)學(xué)生認(rèn)識(shí)顯微鏡,簡(jiǎn)介各部分的名稱、功能及使用方法,學(xué)生每5人一組操作熟悉顯微鏡。
。2)、各組利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。(師操作演示:安放――對(duì)光――上片――調(diào)焦――觀察。生一步步跟著操作。)
。3)、學(xué)生觀察、記錄、描畫(huà)洋蔥表皮細(xì)胞。教師巡視指導(dǎo),各組的實(shí)驗(yàn)組長(zhǎng)監(jiān)督組員操作是否規(guī)范,要求每個(gè)人都要操作、都要觀察,并將觀察結(jié)果進(jìn)行交流。組長(zhǎng)將大家在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)畫(huà)到科學(xué)記錄本上。
5、全班交流在顯微鏡下的發(fā)現(xiàn)。
。1)各組推薦發(fā)言代表談自己的發(fā)現(xiàn)。
。2)各組將所畫(huà)的觀察結(jié)果向全班展示。
。3)交流討論評(píng)價(jià)。
6、師小結(jié):我們發(fā)現(xiàn)放大鏡比肉眼、顯微鏡比放大鏡看到的細(xì)節(jié)更多,更清楚。我們發(fā)現(xiàn)洋蔥表皮是由一個(gè)個(gè)比較規(guī)則的多邊形組成的,而且大多呈長(zhǎng)方形,外為細(xì)胞壁,內(nèi)為無(wú)色細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核。洋蔥表皮上的一個(gè)個(gè)小房間似的結(jié)構(gòu),就是洋蔥的細(xì)胞。(師一邊描述一邊畫(huà)洋蔥細(xì)胞簡(jiǎn)圖)
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
回收實(shí)驗(yàn)器材,整理實(shí)驗(yàn)桌。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告6
實(shí)驗(yàn): 練 習(xí) 使 用 顯 微 鏡
目的要求:
1、練習(xí)使用顯微鏡,學(xué)會(huì)規(guī)范的操作方法。
2、能夠獨(dú)立操作顯微鏡。
3、能夠?qū)?biāo)本移動(dòng)到視野中央,并看到清晰的圖象。
材料用具:
顯微鏡、e字玻片、動(dòng)植物永久玻片、擦鏡紙、紗布
方法和步驟:
一、對(duì)照?qǐng)D示認(rèn)識(shí)顯微鏡,識(shí)別顯微鏡的結(jié)構(gòu)及各部分的作用。
二、練習(xí)使用顯微鏡
1、取鏡和安放
右手握住鏡臂,左手托住鏡座。 把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,略偏左(顯微鏡放在距實(shí)驗(yàn)臺(tái)邊緣7厘米左右處)。安裝好目鏡和物鏡。
2、對(duì)光
轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔(物鏡的前端與載物臺(tái)要保持2厘米的距離)。 把一個(gè)較大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。左眼注視目鏡內(nèi)(右眼睜開(kāi),便于畫(huà)圖)。轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線通過(guò)通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過(guò)目鏡,可以看到白亮的視野。
3、放置玻片標(biāo)本
4、觀察 (先低后高)
把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中心。 轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止(眼 睛看著物鏡,以免物鏡碰到玻片標(biāo)本)。 左眼向目鏡內(nèi)看,同時(shí)反方向轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩上升,直到看清物像為止。再略微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使看到的物像更加清晰。
5、收放
注意事項(xiàng)
1、注意安全,不要損傷顯微鏡、目鏡和物鏡。
2、材料對(duì)準(zhǔn)通光孔,用壓片夾將玻片壓好。
3、下降鏡筒時(shí),不要注視目鏡,一定要注視物鏡,以免損壞玻片標(biāo)本和物鏡頭。
4、取下玻片標(biāo)本時(shí)要小心;
5、實(shí)驗(yàn)完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,把兩個(gè)物鏡偏到兩旁, 1
并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里,送回原處。 思考回答:
1、在進(jìn)行低倍鏡觀察時(shí),使鏡筒下降至接近玻片的過(guò)程中,眼睛應(yīng)注視什么地方?為什么?
2、光線較暗時(shí),應(yīng)選用反光鏡的平面還是凹面?
3、怎樣計(jì)算出視眼中的圖像的放大倍數(shù)?
4、若視眼中“e”位于左上方,怎樣操作才能將其移到視眼中央?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告7
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1. 學(xué)會(huì)提取和分離葉綠體中色素的方法。
2. 比較、觀察葉綠體中四種色素:理解它們的特點(diǎn)及與光合作用的關(guān)系
二、實(shí)驗(yàn)原理
光合色素主要存在于高等植物葉綠體的基粒片層上,而葉綠體中的色素能溶于有機(jī)溶劑
中。故要提取色素,要破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),破壞葉綠體膜,使基粒片層結(jié)構(gòu)直接與有機(jī)溶劑接
觸,使色素溶解在有機(jī)溶劑中。
葉綠體中的色素有四種,不同色素在層析液(脂溶性強(qiáng)的有機(jī)溶劑)中的溶解度不同,
因而隨層析液的擴(kuò)散速度也不同。
三、材料用具
取新鮮的綠色葉片、定性濾紙、燒杯、研缽、漏斗、紗布、剪刀、小試管、培養(yǎng)皿、毛細(xì)吸管、量筒、有機(jī)溶劑、層析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸鈣。
四、實(shí)驗(yàn)過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P54)
1.提取色素:
2.制備濾紙條:
3.色素分離,紙層析法。(不要讓濾液細(xì)線觸及層析液)
4.觀察:
層析后,取出濾紙,在通風(fēng)處吹干。觀察濾紙條上出現(xiàn)色素帶的數(shù)目、顏色、位置和寬窄。結(jié)果是:4條色素帶從上而下依次是:胡蘿卜素(橙黃色)、葉黃素(黃色)、葉綠素a(藍(lán)綠色)、葉綠素b(黃綠色)。
五、討論
1.濾紙條上的濾液細(xì)線為什么不能接觸到層析液?
2.提取和分離葉綠體中色素的關(guān)鍵是什么?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告8
實(shí)驗(yàn)一:練習(xí)使用顯微鏡
目的要求:
1.練習(xí)使用顯微鏡,學(xué)會(huì)規(guī)范的操作方法。
2.能夠獨(dú)立操作顯微鏡。
3.能夠?qū)?biāo)本移動(dòng)到視野中央,并看到清晰的圖象。
材料用具:顯微鏡,寫(xiě)有“上”字的玻片,動(dòng)、植物玻片標(biāo)本,擦鏡紙,紗布。
方法步驟
1.右手握住鏡臂,左手托住鏡座。
2.把顯微鏡放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)距邊緣7厘米左右處,略偏左。安裝好目鏡和物鏡。
3.動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。
4.把一個(gè)較大的光圈對(duì)準(zhǔn)通光孔。一只眼注視目鏡內(nèi),另一只眼睜開(kāi)。轉(zhuǎn)動(dòng)反光鏡,使光線通過(guò)通光孔反射到鏡筒內(nèi)。通過(guò)目鏡可以看到白亮的圓形視野。
5.把所要觀察的玻片標(biāo)本放在載物臺(tái)上,用壓片夾壓住,標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中心。
6.轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩下降,直到物鏡接近玻片標(biāo)本為止此時(shí)眼睛一定要看著物鏡)。
7.一只眼向目鏡內(nèi)看,同時(shí)逆時(shí)針?lè)较蜣D(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋,使鏡筒緩緩上升直到看清物象為止。再略微轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺旋,使看到的物象更加清晰。
8.練習(xí)將所觀察的標(biāo)本移到視野中央,先移動(dòng)一下標(biāo)本,物象朝相反的方向移動(dòng)。說(shuō)明了在目鏡中看到的像是真實(shí)的像的倒像。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)完畢,把顯微鏡的外表擦拭干凈。如需擦拭目鏡和物鏡,請(qǐng)用擦鏡紙。轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,把兩個(gè)物鏡偏到兩旁,并將鏡筒緩緩下降到最低處。最后把顯微鏡放進(jìn)鏡箱里,送回原處。
討 論
1.顯微鏡的使用步驟有哪些?
答:1、取鏡和安放2、對(duì)光3、觀察(放片、調(diào)焦) 4、清潔與收鏡
2.使用顯微鏡觀察時(shí),為什么在下降鏡筒時(shí)眼睛要注視物鏡?
答:物鏡把載玻片壓碎,也容易劃傷物鏡。
3.在顯微鏡下能看清寫(xiě)在不透明紙上的“上”字嗎?
答:看不到,不透明的紙會(huì)阻擋光線從物鏡進(jìn)入光筒再?gòu)哪跨R射出,所以可能什么也看不見(jiàn)。
實(shí)驗(yàn)時(shí)間:20xx.9.15
實(shí)驗(yàn)二:觀察植物細(xì)胞
實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/p>
1、制作植物細(xì)胞的臨時(shí)裝片,學(xué)習(xí)制作臨時(shí)裝片的基本辦法.
2、認(rèn)識(shí)植物細(xì)胞等基本結(jié)構(gòu). 3、練習(xí)畫(huà)細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖.
實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備:
分組實(shí)驗(yàn)器材:顯微鏡、洋蔥、小刀、清水、滴管、吸水紙、載玻片、蓋玻片、鑷子、放大鏡等。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、制作洋蔥表皮玻片標(biāo)本
1、用潔凈地紗布把載玻片擦拭干凈。
2、把載玻片放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,用滴管在載玻片的中央滴一滴清水。
制作臨時(shí)裝片
3、用鑷子從洋蔥鱗片葉內(nèi)側(cè)撕取一小塊透明在膜——內(nèi)表皮。把撕下的內(nèi)表皮浸入載玻片的水滴中,用鑷子把它展平。
4、用鑷子夾起蓋玻片,是它的一邊先解除4載玻片上的水滴,然后緩緩地放下,蓋在要觀察的材料上,這樣才能避免蓋玻片下面出現(xiàn)氣泡而影響觀察。
染色
5、把一滴稀碘液滴在蓋玻片的一側(cè)。
6、用吸水紙從蓋玻片的另一側(cè)吸引,使染液浸潤(rùn)標(biāo)本的全部。
三、觀察洋蔥表皮細(xì)胞
利用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞,先用低倍鏡下觀察,再在高倍鏡下觀察。
四、洋蔥鱗片葉表皮細(xì)胞圖。
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)束。
回收實(shí)驗(yàn)器材,整理實(shí)驗(yàn)桌。
實(shí)驗(yàn)時(shí)間: 20xx.9.22
實(shí)驗(yàn)三:觀察人體口腔上皮細(xì)胞
目的要求:
1. 制作和觀察人體口腔上皮細(xì)胞的臨時(shí)裝片
2. 認(rèn)識(shí)人體口腔上皮細(xì)胞的結(jié)構(gòu)
3. 熟練畫(huà)細(xì)胞結(jié)構(gòu)圖
材料用具:
顯微鏡、吸水紙、載玻片、蓋玻片、生理鹽水、碘液、鑷子、紗布、漱口杯、牙簽 方法步驟
(一) 制作人口腔上皮細(xì)胞的臨時(shí)裝片
1. 用紗布擦凈載玻片、蓋玻片(很薄,應(yīng)輕擦)
2. 在載玻片中央滴一滴生理鹽水(0.9%),說(shuō)明:為什么用0.9%的生理鹽水,觀
察洋蔥表皮裝片用清水,都是為了讓細(xì)胞所處的環(huán)境和它們所生活的環(huán)境相同,
不至于脹破或變形,使細(xì)胞保持原狀。
3. 漱凈口。目的:將口腔的飯粒清除,以保證所取的細(xì)胞純度。
4. 用牙簽在口腔內(nèi)壁輕劃幾下,將上面附有碎屑涂抹在生理鹽水中,盡量涂均勻。
5. 蓋蓋玻片。用鑷子夾起蓋玻片,使它的一側(cè)先接觸載玻片的水滴,然后慢慢放
平(注意:避免產(chǎn)生氣泡)。
6. 染色。①在蓋玻片一側(cè)滴加稀碘液,②用吸水紙?jiān)谏w玻片另一側(cè)吸引,使染液
浸潤(rùn)標(biāo)本的全部。
(二) 用顯微鏡觀察。
使用顯微鏡①安放②對(duì)光③放置玻片標(biāo)本,調(diào)節(jié)焦距,用眼觀察,在視野中會(huì)看到被染成桔黃色的上皮細(xì)胞.
。ㄈ├L圖:
人體口腔上皮細(xì)胞模式圖
。ㄋ模┱恚呵鍧嵅F瑥U物放在指定位置。
歸納討論:人的口腔上皮細(xì)胞有哪些基本結(jié)構(gòu),植物細(xì)胞和動(dòng)物細(xì)胞相同和不同之處。 答:人的口腔上皮細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì)和細(xì)胞核;植物細(xì)胞與動(dòng)物細(xì)胞相比,細(xì)胞壁、葉綠體和液泡是植物細(xì)胞特有的。
實(shí)驗(yàn)時(shí)間: 20xx.9.27
實(shí)驗(yàn)四:觀察人體的基本組織
目的要求:
1.觀察人體基本組織的永久切片,認(rèn)識(shí)人體的四種基本組織;
2.描述同一種組織中細(xì)胞的共同特點(diǎn);
3.描述不同組織中細(xì)胞形態(tài)上的不同之處;
4.根據(jù)觀察,概述組織的共同特點(diǎn),形成組織的概念。
材料器具:
顯微鏡;扁平上皮、立方上皮、柱狀上皮等上皮組織玻片;橫紋肌、骨骼肌、心肌等肌肉組織玻片;骨、軟骨、血液、韌帶、肌腱、脂肪等結(jié)締組織玻片;神經(jīng)組織的玻片。
方法步驟:
1.根據(jù)教師提供的玻片,逐個(gè)在顯微鏡低倍鏡下認(rèn)真觀察,注意細(xì)胞的形態(tài)特征和細(xì)胞間的聯(lián)系特點(diǎn)。
2.根據(jù)觀察,同組間的同學(xué)互相討論,認(rèn)真填寫(xiě)下表。
主要分布位組織類型 主要特征 功能 舉例 置
皮膚,消化 皮膚,小腸腺上皮組織 排列緊密形成表面 保護(hù),分泌 道 上皮
四肢,軀 骨骼肌,平滑肌肉組織 呈長(zhǎng)條狀緊密排列 干,內(nèi)臟器 收縮,舒張 肌 官
支持,連接, 軟骨,軟組結(jié)締組織 細(xì)胞之間間隙較大 全身各處 保護(hù),營(yíng)養(yǎng) 織,血液
產(chǎn)生傳導(dǎo)興神經(jīng)組織 形狀獨(dú)特呈發(fā)散狀 神經(jīng)系統(tǒng) 神經(jīng)纖維 奮
實(shí)驗(yàn)時(shí)間:20xx.10.26
實(shí)驗(yàn)五:觀察葉片結(jié)構(gòu)
目的要求:
1,練習(xí)徒手切片.
2認(rèn)識(shí)葉片的結(jié)構(gòu).
3畫(huà)葉片的表皮細(xì)胞和保衛(wèi)細(xì)胞圖.
材料用具:
新鮮葉片,顯微鏡,雙面刀片,鑷子,載玻片,蓋玻片,葉片的永久切片,盛有清水的培養(yǎng)皿,滴管,吸水紙,碘液,紗布,毛筆,小木板.
方法步驟:
一,練習(xí)徒手切片,制作葉片橫切片的臨時(shí)切片
1,把新鮮的葉片平放在小木板上.
2,右手捏緊并排的兩片刀片,沿著圖中虛線的方向,迅速切割.
3,刀片的夾縫中春游切下的薄片.要多切幾次(每且一次,刀片要咱蘸一下稅)。把切下的薄片放入水中。
4,用毛筆蘸出最薄的一片,制成臨時(shí)切片。
二,觀察葉片的結(jié)構(gòu)
1用顯微鏡先觀察葉片橫切面的臨時(shí)切片,再觀察葉片的永久橫切片。
2在顯微鏡下分清業(yè)的表皮,葉肉和葉脈。
三,觀察葉片的下表皮
1用鑷子撕下一小塊葉片(如蠶豆葉片的下表皮,制成臨時(shí)裝片。
2 用顯微鏡進(jìn)行觀察,看一看葉片下表皮的細(xì)胞是什么樣子的,下表皮上有沒(méi)有氣孔?下表皮氣孔多于上表皮。
四,實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
討論:保衛(wèi)細(xì)胞和它周圍的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上有什么不同?保衛(wèi)細(xì)胞的這種結(jié)構(gòu)特點(diǎn)對(duì)蒸騰作用有什么意義?
答:當(dāng)水分充足時(shí),保衛(wèi)細(xì)胞膨脹張開(kāi),則氣孔張開(kāi),這時(shí),蒸騰作用很強(qiáng);當(dāng)水分不充足時(shí),保衛(wèi)細(xì)胞收縮關(guān)閉,則氣孔關(guān)閉,這時(shí),蒸騰作用變?nèi)酢1Pl(wèi)細(xì)胞能夠控制氣孔開(kāi)關(guān),所以也就能起到促進(jìn)或減緩蒸騰作用的意義。
實(shí)驗(yàn)時(shí)間:20xx.12.5
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告9
實(shí)驗(yàn)生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
初步掌握鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。
二、實(shí)驗(yàn)原理
1.還原糖的鑒定原理生物組織中普遍存在的還原糖種類較多,常見(jiàn)的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。它們的分子內(nèi)都含有還原性基團(tuán)(游離醛基或游離酮基),因此叫做還原糖。蔗糖的分子內(nèi)沒(méi)有游離的半縮醛羥基,因此叫做非還原性糖,不具有還原性。本實(shí)驗(yàn)中,用斐林試劑只能檢驗(yàn)生物組織中還原糖存在與否,而不能鑒定非還原性糖。
斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/mL的硫酸銅溶液配制而成,二者混合后,立即生成淡藍(lán)色的Cu(OH)2沉淀。Cu(OH)2與加入的葡萄糖在加熱的條件下,能夠生成磚紅色的Cu2O沉淀,而葡萄糖本身則氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式如下:
CH2OH—(CHOH)4—CHO+2Cu(OH)2→CH2OH—(CHOH)4—COOH+Cu2O↓+2H2O
用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液的顏色變化過(guò)程為:淺藍(lán)色棕色磚紅色(沉淀)。
2.蛋白質(zhì)的鑒定原理鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1g/mL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01g/mL(B)的硫酸銅溶液。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC—NH—CONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物,這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。
3.脂肪的鑒定原理脂肪可以被蘇丹Ⅲ染成橘黃色,被蘇丹Ⅳ染成紅色
三、實(shí)驗(yàn)過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P18)
四、實(shí)驗(yàn)用品(見(jiàn)書(shū)P18)
五、注意
1.關(guān)于鑒定還原糖的實(shí)驗(yàn),在加熱試管中的溶液時(shí),應(yīng)該用試管夾夾住試管上部,并放入盛開(kāi)水的大燒杯中加熱。注意試管底部不要接觸燒杯底部,同時(shí)試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者,以免試管內(nèi)溶液沸騰時(shí)沖出試管,造成燙傷。如果試管內(nèi)溶液過(guò)于沸騰,可以上提試管夾,使試管底部離開(kāi)大燒杯中的開(kāi)水。
2.斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后方可使用,切勿將甲液和乙液分別加入組織樣液中。
3.蛋白質(zhì)的鑒定中先加雙縮脲A,再加雙縮脲B
六、討論
鑒定生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的根據(jù)是什么?
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告10
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1. 初步學(xué)會(huì)觀察植物細(xì)胞質(zhì)壁分離和復(fù)原的方法。
2. 理解植物細(xì)胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實(shí)驗(yàn)原理
當(dāng)細(xì)胞液的濃度小于外界溶液的濃度時(shí),細(xì)胞液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入外界溶液中,使細(xì)胞壁和原生質(zhì)層都出現(xiàn)一定的收縮。由于原生質(zhì)層比細(xì)胞壁的收縮性大,當(dāng)細(xì)胞不斷失水時(shí),原生質(zhì)層就會(huì)與細(xì)胞壁逐漸分離開(kāi),也就是分升了質(zhì)壁分離當(dāng)細(xì)胞液的濃度大于外界溶液的濃度時(shí),外界溶液中的水分就透過(guò)原生質(zhì)層進(jìn)入細(xì)胞液中,整個(gè)原生質(zhì)層就會(huì)慢慢地恢復(fù)成原來(lái)的狀態(tài),使植物細(xì)胞逐漸發(fā)生質(zhì)壁分離復(fù)原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實(shí)驗(yàn)過(guò)程(見(jiàn)書(shū)P60)
物理實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——化學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告 ——實(shí)驗(yàn)報(bào)告格式 ——實(shí)驗(yàn)報(bào)告模板
五、討論
1.如果將洋蔥表皮細(xì)胞浸潤(rùn)在與細(xì)胞液濃度相同的蔗糖溶液中,這些表皮細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)什么現(xiàn)象?
2.當(dāng)紅細(xì)胞細(xì)胞膜兩側(cè)的溶液具有濃度差時(shí),紅細(xì)胞會(huì)不會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象?為什么?
3.畫(huà)一個(gè)細(xì)胞在正常狀態(tài)下到經(jīng)過(guò)0.3g/ml蔗糖溶液處理,再經(jīng)過(guò)清水處理的細(xì)胞變化的一系列模式圖。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告11
質(zhì)粒DNA的提取、純化及檢測(cè)
姓名:XXX學(xué)號(hào):2011001400XX年級(jí):20xx級(jí)生物基地班 實(shí)驗(yàn)日期:20xx年9月16日—30日組別:6組 同組者:XX
一、【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹?/strong>
1、掌握堿變性提取法提取大腸桿菌中質(zhì)粒DNA的原理和方法。
2、學(xué)習(xí)并掌握凝膠電泳進(jìn)行DNA的分離純化的實(shí)驗(yàn)原理。
3、學(xué)習(xí)并掌握凝膠的制備及電泳方法。
4、學(xué)習(xí)并掌握凝膠中DNA的分離純化方法。
二、【實(shí)驗(yàn)原理】
1、質(zhì)粒DNA的制備方法
質(zhì)粒(Plasmid)是獨(dú)立存在于染色體外、能自主復(fù)制并能穩(wěn)定遺傳的一種環(huán)狀雙鏈DNA分子,分布于細(xì)菌、放線菌、真菌以及一些動(dòng)植物細(xì)胞中,但在細(xì)菌細(xì)胞中含量最多。細(xì)菌質(zhì)粒大小介于1~200Kb之間,是應(yīng)用最多的質(zhì)粒類群,在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)它們利用宿主細(xì)胞的復(fù)制機(jī)構(gòu)合成質(zhì)粒自身的DNA。
質(zhì)粒DNA的制備包括3個(gè)步驟:①培養(yǎng)細(xì)菌,使質(zhì)粒DNA大量擴(kuò)增;②收集和裂解細(xì)菌;③分離和純化質(zhì)粒DNA。主要方法包括:堿裂解法:0。2molNaOH+1%SDS;煮沸裂解法:沸水煮沸40秒;SDS裂解法:10%SDS,一般用于質(zhì)粒大量提取。在實(shí)際操作中可以根據(jù)宿主菌株類型、質(zhì)粒分子大小、堿基組成和結(jié)構(gòu)等特點(diǎn)以及質(zhì)粒DNA的用途進(jìn)行選擇。本實(shí)驗(yàn)選擇堿裂解法提取質(zhì)粒DNA。
2、質(zhì)粒DNA的提取——堿變性提取法
在細(xì)菌細(xì)胞中,染色體DNA和質(zhì)粒DNA均被釋放出來(lái),但是兩者變性與復(fù)性所依賴的溶pH值不同。在pH值高達(dá)12。0的堿性溶液中,染色體DNA的氫鍵斷裂,雙螺旋結(jié)構(gòu)解開(kāi)而變性;共價(jià)閉合環(huán)狀質(zhì)粒DNA的大部分氫鍵斷裂,但兩條互補(bǔ)鏈不完全分離。因?yàn)樗鼈冊(cè)谕負(fù)鋵W(xué)上是相互纏繞的。當(dāng)用pH值4。6的KAc(NaAc)高鹽溶液調(diào)節(jié)堿性溶液至中性時(shí),變性的質(zhì)粒DNA可恢復(fù)原來(lái)的共價(jià)閉合環(huán)狀超螺旋結(jié)構(gòu)而溶解于溶液中;但染色體DNA不能復(fù)性,而是與不穩(wěn)定的大分子RNA、蛋白質(zhì)—SDS復(fù)合物等一起形成纏連的、可見(jiàn)的白色絮狀沉淀。這種沉淀通過(guò)離心,與復(fù)性的溶于溶液的質(zhì)粒DNA分離。溶于上清液的質(zhì)粒DNA,可用無(wú)水乙醇和鹽溶液,使之凝聚而形成沉淀。由于DNA和RNA性質(zhì)類似,乙醇沉淀
DNA的同時(shí),也伴隨著RNA沉淀,可利用RNaseA將RNA降解。質(zhì)粒DNA溶液中的RNaseA以及一些可溶性蛋白,可通過(guò)酚/氯仿抽提除去,最后獲得純度較高的質(zhì)粒DNA。
3、凝膠電泳進(jìn)行DNA分離純化
電泳(electrophoresis)是帶電物質(zhì)在電場(chǎng)中向著與其電荷相反的電極方向移動(dòng)的現(xiàn)象。各種生物大分子在一定pH條件下,可以解離成帶電荷的離子,在電場(chǎng)中會(huì)向相反的電極移動(dòng)。凝膠是支持電泳介質(zhì),它具有分子篩效應(yīng)。含有電解液的凝膠在電場(chǎng)中,其中的電離子會(huì)發(fā)生移動(dòng),移動(dòng)的速度可因電離子的大小形態(tài)及電荷量的不同而有差異。利用移動(dòng)速度差異,就可以區(qū)別各種大小不同的分子。因而,凝膠電泳可用于分離、鑒定和純化DNA的片段,是分子生物學(xué)的核心技術(shù)之一。
凝膠電泳技術(shù)操作簡(jiǎn)單而迅速,分辨率高,分辨范圍廣。此外,凝膠中DNA的位置可以用低濃度熒光插入染料如溴化乙錠(ethidium bromide,EB)或SYBR Gold染色直接觀察到,甚至含量少至20pg的雙鏈DNA在紫外激發(fā)下也能直接檢測(cè)到。需要的話,這些分離的DNA條帶可以從凝膠中回收,用于各種各樣目的的實(shí)驗(yàn)。
分子生物學(xué)中,常用的兩種凝膠為瓊脂糖(agarose)和聚丙烯酰胺凝膠。這兩種凝膠能灌制成各種形狀、大小和孔徑,也能以許多不同的構(gòu)型和方位進(jìn)行電泳。聚丙烯酰胺凝膠分辨率高,使用于較小分子核酸(5—500bp)的分離和蛋白質(zhì)電泳。它的分辨率非常高,長(zhǎng)度上相差1bp或質(zhì)量上相差0。1%的DNA都可以彼此分離,這也是采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行DNA序列分析的分子基礎(chǔ)。雖然它能很快地進(jìn)行電泳,并能容納較大的DNA上樣量,但是與瓊脂糖凝膠相比,在制備和操作上繁瑣。瓊脂糖是從海藻中提取的長(zhǎng)鏈狀多聚物,由β—D—吡喃半乳糖與3,6—脫水—L—吡喃半乳糖組成,相對(duì)分子質(zhì)量為104—105。瓊脂糖加熱至90℃左右,即可溶化形成清亮、透明的液體,澆在模版上冷卻后形成凝膠,其凝固點(diǎn)為40—45℃。瓊脂糖凝膠相對(duì)于聚丙烯酰胺凝膠分辨率低,但它的分離范圍更大(50至百萬(wàn)bp),小片段DNA(50—20000bp)最適合在恒定輕度和方向的電場(chǎng)中水平方向的瓊脂糖凝膠內(nèi)電泳分離。瓊脂糖凝膠電泳易于操作,適用于核酸電泳,測(cè)定DNA的相對(duì)分子質(zhì)量,分離經(jīng)限制酶水解的DNA的片段,進(jìn)一步純化DNA等。
瓊脂糖凝膠電泳是一種常用的方法。在溶液中,由于核酸有磷酸基而帶有負(fù)電荷,在電場(chǎng)中向正極移動(dòng)。DNA在瓊脂糖凝膠中的電泳遷移率主要取決于6個(gè)因素:樣品DNA分子的大小、DNA分子的構(gòu)象、瓊脂糖濃度、電泳所用電場(chǎng)、緩沖液和溫度。
三、【實(shí)驗(yàn)材料】
1、實(shí)驗(yàn)儀器
培養(yǎng)皿、接種環(huán)、三角瓶、酒精燈、恒溫振蕩培養(yǎng)箱、50ml離心管、1。5ml塑料離心管(Eppendorf管)、高速離心機(jī)、漩渦振蕩器、微量移液器、不同型號(hào)槍頭、天平、制膠槽、梳子、電泳儀、吸管、量筒、微波爐、滅菌鍋、恒溫水浴鍋、試劑瓶、衛(wèi)生紙和記號(hào)筆、手套等。
2、實(shí)驗(yàn)試劑
LB培養(yǎng)基,抗生素Ap(氨芐青霉素),溶液Ⅰ,溶液Ⅱ,溶液Ⅲ,RNaseA母液,TE緩沖液,飽和酚,氯仿/異戊醇混合液,酚/氯仿/異戊醇(PCI)混合液,預(yù)冷無(wú)水乙醇,TAE電泳緩沖液(10×),上樣緩沖液(6×),瓊脂糖,溴化乙錠(EB),DNA相對(duì)分子質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)物DNA Marker λ/Hind Ⅲ,5mol/L pH 5。2的醋酸鈉。
四、【實(shí)驗(yàn)步驟】
1、準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)
配制LB液體培養(yǎng)基,分裝到100ml的三角瓶中20ml,300ml的三角瓶中50ml,另配LB固體培養(yǎng)基;準(zhǔn)備1000ul、200ul、10ul移液槍尖各一盒,1。5ml離心管若干于500ml三角瓶中,50ml離心管2個(gè) ,將上述物品包好連同配好的培養(yǎng)基一同滅菌。
2、菌體培養(yǎng)
在含有Ap的LB平板上挑取一環(huán)攜帶有質(zhì)粒pUC19的E。coli DH5單菌落,接種于20mlLB液體培養(yǎng)基中進(jìn)行37℃振蕩過(guò)夜培養(yǎng),培養(yǎng)基中加Ap100ul
。100ug/ml),質(zhì)粒pUC19具有Ap抗性基因,使得帶有pUC19的質(zhì)粒得以生長(zhǎng)。 過(guò)夜培養(yǎng)后菌體量大,雜質(zhì)較多,然后用移液槍吸取過(guò)夜培養(yǎng)物2ml轉(zhuǎn)接于50mlLB液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)基中加入Ap250ul,37℃振蕩培養(yǎng)4—6h至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后期,生長(zhǎng)速率快,代謝旺盛,酶系活躍,雜質(zhì)少,適合提取質(zhì)粒。
3、質(zhì)粒提取
(1)稱量空的50ml離心管的重量為14。331g,然后將三角瓶中的菌液倒至管中,不能倒?jié)M,液面距管口約1cm,7000rpm離心5分鐘后棄去上清液,收集菌體細(xì)胞。
。2)向離心管中懸滴加入5ml冰預(yù)冷的溶液Ⅰ打散菌體洗滌,用漩渦振蕩器使之充分懸浮后用槍尖吹吸混勻,同步驟(1)離心,棄去上清,將離心管倒置于吸水紙上,使上清液全部流盡干燥,然后稱重得14。437g,則菌體質(zhì)量為106mg。
。3)洗滌后每100mg菌體應(yīng)加入冰預(yù)冷的溶液Ⅰ1ml,106mg菌體按100mg菌體處理,加入溶液Ⅰ1ml,打散菌泥、吹吸混勻,冰浴5min。溶液Ⅰ中的葡萄糖使
溶液密度增加,懸浮后的大腸桿菌不會(huì)快速沉積到管子的底部;維持滲透壓,防止細(xì)胞提前破裂,防止DNA受機(jī)械剪切力作用而降解。EDTA是Ca2+和Mg2+等二價(jià)金屬離子的螯合劑,可抑制DNase的活性,抑制微生物的生長(zhǎng)。Tris—Cl溶液提供適當(dāng)?shù)膒H。
。4) 按比例加入新配制的溶液Ⅱ2ml(與溶液Ⅰ對(duì)應(yīng)),輕加輕搖,冰浴5min。溶液變清亮透明粘稠如蛋清狀。溶液Ⅱ中的NaOH使細(xì)胞膜發(fā)生了從bilayer(雙層膜)結(jié)構(gòu)向micelle(微囊)結(jié)構(gòu)的相變化導(dǎo)致細(xì)胞溶解。同時(shí),強(qiáng)堿性使染色體DNA、質(zhì)粒DNA和蛋白質(zhì)變性;SDS為下一步沉淀做鋪墊。
(5)按比例加入冰預(yù)冷的溶液Ⅲ1。5ml(與溶液Ⅰ、Ⅱ?qū)?yīng)),輕加輕搖,冰浴10min。溶液出現(xiàn)白色絮狀沉淀。沉淀為蛋白質(zhì)SDS復(fù)合物、細(xì)胞碎片和其他大分子成分。溶液Ⅲ中的HAc中和NaOH,因?yàn)殚L(zhǎng)時(shí)間的堿性條件會(huì)打斷基因組DNA,只要是50-100 kb大小的片斷,就不能再被PDS共沉淀。同時(shí)變性的質(zhì)粒DNA復(fù)性。反應(yīng)形成的高鹽環(huán)境進(jìn)一步加速了沉淀。
(6)12000rpm離心15min,白色沉淀聚集在離心管一側(cè),用移液槍將上清液轉(zhuǎn)移到另一潔凈的離心管中。然后向上清液中加入1/10體積的3MNaAc混勻,加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。乙醇可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會(huì)起任何化學(xué)反應(yīng),對(duì)DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在,當(dāng)加入乙醇時(shí),乙醇會(huì)奪去DNA周圍的水分子,使DNA失水而易于聚合。在pH為8左右的溶液中,DNA分子是帶負(fù)電荷的,加一定濃度的NaAc或NaCl,易于互相聚合而形成DNA鈉鹽沉淀。
。7) 以12000rpm離心15min,小心倒去上清液,得到DNA沉淀。加入3ml70%冰乙醇,輕輕地覆蓋沉淀,不打散沉淀,洗滌一次。
(8)以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。去掉上清液,將離心管上沉淀部位做好標(biāo)記,將離心管倒置于吸水紙上,干燥5min。粗提取的質(zhì)粒呈淺黃色,隨著水分的減少質(zhì)粒變?yōu)闊o(wú)色。所以為了完全溶解質(zhì)粒,要在離心管上標(biāo)記質(zhì)粒所在位置。
。9)將DNA沉淀溶于1mlTE緩沖液中,移液槍吹吸助溶,然后將溶解液轉(zhuǎn)移到一個(gè)Eppendorf管中。TE是pH緩沖液,為DNA提供穩(wěn)定的生理狀態(tài),呈弱堿性,有利于保護(hù)堿基對(duì)。同時(shí)含有EDTA是二價(jià)陽(yáng)離子的螯合劑,抑制DNA酶作用。
4、質(zhì)粒純化
。1)Eppendorf管中加入RNase A(純濃度>50ug/ml),37℃保溫0。5—1h
。2)將上述的溶液平均分配到2個(gè)1。5ml的微量離心管中,每管0。5ml,分別加入與溶液等體積的(500ul)Tris飽和苯酚溶液,振蕩混勻,7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是經(jīng)Tris飽和后的,顯黃色。苯
酚加入后,溶液分層,苯酚向下,下層呈淺黃色,上層溶液無(wú)色,在中間產(chǎn)生大量白色沉淀,此為變性后的蛋白質(zhì)。
。3)加入等體積的(500ul)苯酚/氯仿溶液(1:1),振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到到另一潔凈的Eppendorf管中。苯酚是強(qiáng)的蛋白變性劑,但是苯酚留在質(zhì)粒溶液中會(huì)影響DNA的酶切,它本身易被氧化,會(huì)損傷質(zhì)粒。氯仿也是蛋白變性劑,但是比酚弱,且能溶解質(zhì)粒中的脂類,溶解苯酚,去除溶液中的苯酚。異戊醇則可起消除抽提過(guò)程中出現(xiàn)的泡沫,有利于分層更明顯。此時(shí)溶液中已看不到明顯的白色沉淀,但仍有蛋白質(zhì)的存在。
。4)加入等體積的氯仿溶液,振蕩混勻, 7000rpm,離心5min,上清液轉(zhuǎn)移到一潔凈的Eppendorf管中,得上清液400ul。
。5)向上清液中加入1/10體積的NaAc混勻,再加入2倍體積的冰無(wú)水乙醇,混勻,—20℃下沉降30分鐘。
(6)以12000rpm,離心15min,棄去上清液,得到DNA沉淀,為白色。
。7)向DNA沉淀中加入70%冰乙醇200ul,不打散沉淀,洗滌。然后以12000rpm離心5min,離心管底部DNA沉淀所在面應(yīng)與收集沉淀面一致。
。8)去掉上清液,將離心管倒置于吸水紙上,室溫干燥。用50ulTE溶解于1管中。
5、質(zhì)粒檢測(cè)
。1)稱取0。4g的瓊脂糖,置于一錐形瓶中,在三角瓶上標(biāo)好液面位置,加入40ml的1×TAE電泳緩沖液,再加入5—10ml重蒸水,以補(bǔ)充在溶膠過(guò)程中損失的水分。然后置微波爐加熱至完全溶化,溶液透明。冷卻至50℃左右,倒入制板槽制板。
。2)待膠凝固后,小心拔起梳子,使加樣孔端置陰極段放進(jìn)電泳槽內(nèi)。在槽內(nèi)加入1×TAE 電泳緩沖液,至液面覆蓋過(guò)膠面2—3cm。取1μl加電泳載樣液和3μl質(zhì)粒樣品于小紙片上,用移液槍混勻。
。3)電泳1h,觀察溴酚蘭的帶(藍(lán)色)的移動(dòng)。
。4) 把膠槽取出,小心滑出膠塊,放進(jìn)EB溶液中進(jìn)行染色,完全浸泡約5min。
。5)凝膠成像儀觀察。
五、【注意事項(xiàng)】
。1)滴加溶液II時(shí),要逐滴加入,且要輕加輕搖溶液使之混勻,整體動(dòng)作要快,因?yàn)閺?qiáng)堿在溶液中停留時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)破壞質(zhì)粒DNA。
(2)加入溶液III后,生成了大量的絮狀沉淀,溶液III中和強(qiáng)堿使質(zhì)粒復(fù)性,不可劇烈震蕩, 防止染色體DNA斷裂,應(yīng)該上下顛倒離心管,使其混勻。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告12
一、實(shí)驗(yàn)名稱:
用顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞
二、實(shí)驗(yàn)材料:
顯微鏡、洋蔥表皮細(xì)胞切片,及其他細(xì)胞裝片。
三、實(shí)驗(yàn)步驟:
1、右手握住鏡臂,左手托住鏡座,把顯微鏡向著光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上。
2、對(duì)光:轉(zhuǎn)動(dòng)轉(zhuǎn)換器,使低倍物鏡對(duì)準(zhǔn)通光孔。
3、調(diào)節(jié)載物臺(tái)下的反光鏡,從目鏡往下看,能看見(jiàn)亮的光圈。
4、觀察:調(diào)節(jié)粗準(zhǔn)焦螺旋,把所要觀察的洋蔥表皮切片放在載物臺(tái)上,用壓片夾夾住,標(biāo)本要正對(duì)通光孔的中央。
5、左眼向目鏡內(nèi)看,同時(shí)轉(zhuǎn)動(dòng)粗準(zhǔn)焦螺旋等,直到看清切片上的細(xì)胞為止,最后整理器材。
四、使用注意事項(xiàng):
1、取送顯微鏡時(shí),應(yīng)右手握住鏡臂,左手托住鏡座,輕拿輕放。
2、鏡檢時(shí),坐姿端正,一般用左眼觀察物象,用右眼看著實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙畫(huà)圖。兩眼須同時(shí)睜開(kāi)。
3、切忌一面從目鏡進(jìn)行觀察,一面使鏡筒下降,這樣容易使物鏡與玻片標(biāo)本碰撞而損壞。
4、在高倍鏡下調(diào)節(jié)焦距時(shí),切勿使用粗調(diào)節(jié)器,以免壓壞標(biāo)本,損壞物鏡。
5、顯微鏡使用完畢必須先上升鏡筒,移開(kāi)鏡頭后再取出玻片標(biāo)本,以免取玻片時(shí)擦損鏡頭的鏡面。
五、實(shí)驗(yàn)原理:
利用教學(xué)顯微鏡觀察洋蔥表皮細(xì)胞。
六、創(chuàng)新點(diǎn):
在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中為學(xué)生提供多種細(xì)胞裝片,以供學(xué)生操作、觀察,增加了學(xué)生動(dòng)手實(shí)驗(yàn)的時(shí)間,使學(xué)生在實(shí)驗(yàn)中經(jīng)歷調(diào)節(jié)顯微鏡的焦距的過(guò)程,從而熟練掌握教學(xué)教學(xué)顯微鏡的使用方法。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告13
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、通過(guò)對(duì)原核和真核各種形態(tài)細(xì)胞的光學(xué)顯微鏡觀察,了解細(xì)胞的形態(tài)及其顯微結(jié)構(gòu);
2、學(xué)習(xí)顯微測(cè)量的方法,對(duì)細(xì)胞的大小有一直觀認(rèn)識(shí)。
二、實(shí)驗(yàn)材料和儀器:
小白鼠肝細(xì)胞切片;雞血紅細(xì)胞;蠶豆葉片橫切片;
普通光學(xué)顯微鏡;目鏡測(cè)微尺;鏡臺(tái)測(cè)微尺;載玻片;蓋玻片。
三、實(shí)驗(yàn)步驟:
(一)細(xì)胞形態(tài)觀察
l、動(dòng)物細(xì)胞的觀察
(1)人肝細(xì)胞切片:在顯微鏡下仔細(xì)觀察肝細(xì)胞的形態(tài)構(gòu)造。
。2)雞血細(xì)胞涂片的觀察:觀察血細(xì)胞的組成;紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板的形態(tài)特點(diǎn)。
2、植物細(xì)胞的觀察
取蠶豆葉片橫切片的觀察:注意表皮細(xì)胞和葉肉細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)。
(二)細(xì)胞的大小和測(cè)量
1、卸下目鏡的上透鏡,將目鏡測(cè)微尺刻度向下裝在目鏡的焦平面上,再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺(tái)測(cè)微尺刻度向上放在鏡臺(tái)上夾好,使測(cè)微尺分度位于視野中央。調(diào)焦至能看清鏡臺(tái)測(cè)微尺的分度。
3、小心移動(dòng)鏡臺(tái)測(cè)微尺和轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡測(cè)微尺(如目鏡測(cè)微尺分度模糊,可轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡上透鏡進(jìn)行調(diào)焦),使兩尺左邊的一直線重合,然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。
4、記錄兩條重合線間目鏡測(cè)微尺和鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)。按下式計(jì)算目鏡測(cè)微尺每格等于多少μm:
鏡臺(tái)測(cè)微尺的格數(shù)
目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=————————— × 10
目鏡測(cè)微尺的格數(shù)
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1、目鏡校正:40倍顯微鏡目鏡測(cè)微尺每格的微米數(shù)=17/70=0.24
2、細(xì)胞大小的測(cè)量:
五、作業(yè)與思考:
1、血細(xì)胞按含量高低,主要含有:紅細(xì)胞,白細(xì)胞,血小板。
白細(xì)胞最大,紅細(xì)胞次之,血小板最小。紅細(xì)胞:主要的功能是運(yùn)送氧。 白細(xì)胞:主要扮演了免疫的角色,當(dāng)病菌侵入人體時(shí),白細(xì)胞能穿過(guò)毛細(xì)血管壁,集中到病菌入侵部位,將病菌包圍,吞噬。血小板:止血過(guò)程中起著重要作用。細(xì)胞形態(tài)見(jiàn)下圖。
2、植物細(xì)胞一般比動(dòng)物細(xì)胞大一些。形態(tài)圖見(jiàn)下。
3、在不同放大倍數(shù)下,測(cè)定的細(xì)胞大小基本一致,但有一些偏差。放大倍數(shù)越大,在視野中同等實(shí)際距離下的兩點(diǎn)視野距離更大,而更容易測(cè)量準(zhǔn)確。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告14
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
1、掌握顯示細(xì)胞中過(guò)氧化物酶反應(yīng)的原理和方法。2.了解細(xì)胞凋亡的生物學(xué)意義
3、掌握凋亡細(xì)胞的形態(tài)學(xué)檢測(cè)方法
二、實(shí)驗(yàn)原理:
1、細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯(lián)苯胺處理標(biāo)本,細(xì)胞內(nèi)的過(guò)氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色的聯(lián)苯胺藍(lán),進(jìn)而變?yōu)樽厣a(chǎn)物,因而可以根據(jù)顏色反應(yīng)來(lái)判定過(guò)氧化物酶的有無(wú)或多少。中間產(chǎn)物藍(lán)色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的,無(wú)需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細(xì)胞凋亡是指細(xì)胞在生理或病理?xiàng)l件下,遵循自身的程序,自己結(jié)束其生命的過(guò)程。它是一個(gè)主動(dòng)的、高度有序的,基因控制的,一系列酶參與的過(guò)程。
3、凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體;根據(jù)細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行顯微觀察是檢測(cè)細(xì)胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。
三、實(shí)驗(yàn)步驟:
細(xì)胞中過(guò)氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液;
2、取骨髓細(xì)胞:用斷頸法處死小鼠,立即剪取后肢,去除肌肉,剝出后肢股骨,剪開(kāi)股骨一端,用牙簽尖的一端插入剪開(kāi)的小孔中,摳取少許骨髓細(xì)胞置滴有PBS的載片上;
3、涂片:用另一玻片將骨髓細(xì)胞沿一個(gè)方向涂布推開(kāi),室溫晾干;
4、媒染:在涂片上滴0.5%硫酸銅液,以蓋滿涂片為宜,處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液,直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應(yīng)6分鐘(以蓋滿涂片為宜)6、清水沖洗,番紅復(fù)染2min。
7、鏡檢:清水沖洗,室溫晾干,先低倍鏡下觀察,后換高倍鏡下觀察(油鏡100×)
細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測(cè)與觀察吉姆薩染色:
1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學(xué)顯微鏡下觀察。吖啶橙染色:
1、取細(xì)胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細(xì)胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細(xì)胞
3、甲醇:冰醋酸(3:1)固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍(lán)光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。
四、結(jié)果與分析:
1、根據(jù)隨機(jī)選擇的幾個(gè)視野的統(tǒng)計(jì),該樣品的細(xì)胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細(xì)胞凋亡過(guò)程中核染色質(zhì)的形態(tài)變化(吖啶橙染色)
五、思考題:
1、細(xì)胞凋亡的調(diào)控機(jī)制
細(xì)胞凋亡是一個(gè)受基因調(diào)控、眾多細(xì)胞膜受體和胞漿蛋白參與的細(xì)胞主動(dòng)自殺過(guò)程,其觸發(fā)因素多種多樣,包括細(xì)胞內(nèi)誘導(dǎo)因子和抑制因子對(duì)細(xì)胞凋亡的調(diào)控。
2、細(xì)胞凋亡的特征
凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征是:體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮;細(xì)胞核發(fā)生染色質(zhì)凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細(xì)胞膜有小泡狀形成;晚期細(xì)胞膜內(nèi)陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細(xì)胞凋亡的方法
定性的研究方法:常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場(chǎng)倒轉(zhuǎn)瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學(xué)觀察(普通光學(xué)顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡)
定量或半定量的研究方法:各種流式細(xì)胞儀方法、原位末端標(biāo)記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告15
第十次實(shí)驗(yàn)分離產(chǎn)淀粉酶微生物
學(xué)院:生命科學(xué)學(xué)院
專業(yè):生物科學(xué)類
年級(jí):20xx級(jí)
姓名:
學(xué)號(hào):1007040085
20xx年XX月XX日
實(shí)驗(yàn)十分離產(chǎn)淀粉酶的微生物
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>
1、熟悉常用微生物培養(yǎng)基(牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基)的配制方法。
2、學(xué)習(xí)各種無(wú)菌操作技術(shù),并用此技術(shù)進(jìn)行為微生物稀釋分離、劃線分離接種。
3、用平板劃線法和稀釋涂布平板發(fā)分離微生物。
4、認(rèn)識(shí)為微生物存在的普遍性,體會(huì)無(wú)菌操作的重要性。
5、掌握分離產(chǎn)淀粉酶微生物的試驗(yàn)方法和步驟,了解產(chǎn)淀粉酶的微生物種類及形態(tài)。
二、實(shí)驗(yàn)原理
土壤是微生物生活的大本營(yíng),是尋找和發(fā)現(xiàn)有重要應(yīng)用潛力的微生物的主要菌源。不同土樣中各類微生物數(shù)量不同,一般土壤中細(xì)菌數(shù)量最多,其次為放線菌和霉菌。一般在較干燥,偏堿性、有機(jī)質(zhì)豐富的土壤中放線苗數(shù)量較多;酵母菌在一般土壤中的數(shù)量較少,而在水果表皮、葡萄園、果園土中數(shù)量多些。本次實(shí)驗(yàn)從土壤中分離產(chǎn)淀粉酶的微生物,應(yīng)該取那些富含產(chǎn)淀粉酶的微生物的土樣。從復(fù)雜的微生物群體中獲得只含有一種或某一類型微生物的過(guò)程稱為微生物的分離與純化。常用的方法有
1、簡(jiǎn)單單細(xì)胞挑取法
2、平板分離法和稀釋涂布平板法
此次實(shí)驗(yàn)采取的是平板分離法和稀釋涂布平板法結(jié)合,該方法操作簡(jiǎn)單,普遍用于微生物的分離與純化。其原理包括:
1)稀釋后的細(xì)胞懸液圖不在平板上可以分離得單個(gè)菌株
2)在適合于待分離微生物的生長(zhǎng)條件(如營(yíng)養(yǎng)、酸堿度、溫度與氧等)下培養(yǎng)微生物,或加入某種抑制劑造成只利于待分離微生物的生長(zhǎng),而抑制其他微生物生長(zhǎng)的環(huán)境,從而淘汰一些不需要的微生物。
3)微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)形成的單個(gè)菌落可以是由一個(gè)細(xì)胞繁殖而成的集合體。因此可通過(guò)挑取單菌落而獲得純培養(yǎng)。獲得單菌落的方法可通過(guò)稀釋涂布平板或平板劃線等方法完成。
以淀粉作為惟一碳源的培養(yǎng)基培養(yǎng)未分離細(xì)菌,能產(chǎn)淀粉酶的細(xì)菌能生長(zhǎng),且菌落周圍出現(xiàn)透明圈(淀粉不透明,被消化后變透明),則產(chǎn)淀粉酶微生物被分離出來(lái)。本實(shí)驗(yàn)采用透明圈檢驗(yàn)法檢測(cè)培養(yǎng)物中是否有產(chǎn)淀粉酶微生物的生長(zhǎng)。
三、實(shí)驗(yàn)儀器及試劑
1、器材:
培養(yǎng)皿、載玻片、蓋玻片、普通光學(xué)顯微鏡、量筒、滴管、吸水紙、燒杯、三角瓶、酒精燈、玻璃棒、接種環(huán)、鑷子、恒溫培養(yǎng)箱、高壓蒸汽滅菌鍋、、天平、濾紙、pH試紙等。
2、試劑:
配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的原料(牛肉膏、NaCl、瓊脂、蛋白胨)、淀粉、盧戈氏碘液、蒸餾水、250ml三角瓶中裝90ml無(wú)菌水加20粒玻璃珠,作稀釋用等。
3、土樣:
取自貴州大學(xué)農(nóng)生樓后土壤10g,地下10cm左右。
四、實(shí)驗(yàn)步驟:
1、配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基:
1)配制牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基400ml(用于11個(gè)平皿和7支試管斜面)牛肉膏0.5%…………………………………2g
蛋白胨1%……………………………………4g
NaCl0.5%…………………………………..2g
瓊脂2%……………………………………..8g
淀粉0.5%........................................2g
pH……………………………………7.0~7.2
。2)無(wú)菌水的制備
分別取9ml蒸餾水加入5支試管中,加塞后用報(bào)紙包扎捆綁,放入高壓蒸汽滅菌鍋滅菌備用。取90ml蒸餾水加入250ml三角瓶中,同樣的操作,滅菌備用。
。3)器皿的準(zhǔn)備
將刻度吸管用報(bào)紙包扎,培養(yǎng)皿裝入專用滅菌杯分別放入高溫滅菌箱滅菌備用。
2)倒11個(gè)平板和7支試管斜面,包扎,0.1Mp、121℃、滅菌30min.
2、制備土壤稀釋液:
稱取土樣10g,放入盛有250ml無(wú)菌水的帶有玻璃珠的三角瓶中,振蕩搖勻10min使土和水充分混合,然后用移液槍從三角瓶中吸取1ml(此操作要求無(wú)菌操作),加入另一盛有9ml無(wú)菌水的試管中,混合均勻,以此類推分別制成制成0.01、0.001、0.0001、0.00001、0.000001不同稀釋度的土壤溶液。
3、涂布培養(yǎng):
0.00001、0.000001濃度的土壤稀釋液作為涂布平板培養(yǎng)的對(duì)象,將其分別涂布在3個(gè)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基中,共6個(gè)培養(yǎng)基,標(biāo)號(hào),37°C溫箱培養(yǎng)48h。
4、選取目的菌株:
兩天后對(duì)土壤溶液的微生物培養(yǎng)基進(jìn)行觀察,并取兩個(gè)菌落形態(tài)完全一致的分散的單個(gè)菌落,對(duì)其中一個(gè)噴灑盧戈氏碘液,觀察其菌落周圍是否出現(xiàn)透明圈,如果出現(xiàn)透明圈說(shuō)明此菌株產(chǎn)淀粉酶,是目的菌株,記錄細(xì)菌明顯的性狀。
【生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告】相關(guān)文章:
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告精選15篇11-06
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告(15篇)07-19
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告(精選15篇)07-19
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告合集15篇11-09
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告集合15篇11-09
生物實(shí)驗(yàn)報(bào)告匯編15篇11-09